um指的是膜孔徑,而從上面膜的生產過程,我們可以看出,膜的孔徑實際上是沒有辦法界定的.由于干燥成型等過程的非絕對均一,膜的孔徑也是非均一的.膜孔徑的說法實際上是沿用了一直以來的一個形象稱呼.而以秒為單位的定義為,每4cm膜,水的層析時間是***s.該單位已經越來越被各大廠商所接受,成為了一個通用的比較標準.以下我們將采用s單位來進行交流.
換算情況大致為: 8um=135s; 6um=180s.
不同秒數的膜對反應有什么影響呢?
首先,我們分析一下液體在膜上的運動過程. 一張長度為4cm的膜, 每隔1cm做一個標記, 當液體運動過標記處時記錄時間點. 那么你將會發(fā)現液體在膜上的運動是呈減速前行的. 而兩張不同秒數的膜(例如135s, 180s)在同一時間標記點處的運動速度不同.這個試驗用清水做不好觀察,可以考慮用色素水溶液,非常明顯.
那么從這個試驗可以看出,在通過同一T線噴點位置時, 金溶液通過的速度是快速膜大于慢速膜. 那么通過速度越快和包被在T線的物質反應時間也就越短, 讀數快, 那么靈敏度也就越低. 反之, 反應時間長, 讀數慢, 也就靈敏度高. 同時還有一個問題是, 反應時間越長, 發(fā)生非特異性結合的可能性就越大, 所以過長時間的反應不一定就能夠真正的提升靈敏度. 所以這里就有一個讀數時間/反應靈敏度/非特異性結合的均衡.
其實我們并沒有那么多選擇. 經過使用實踐, 各供應商一般都只提供兩個型號, 就是135s和180s. 雖然看到有些廠家的產品目錄上型號種類繁多,但這兩個型號的定貨量就占了95%以上, 其他型號供貨上也就遠不如這兩個型號來得順利. 135s一般用在雙抗體夾心法, 180s一般用在競爭法. 你所要做的是,先選擇其中的一個型號, 然后比較不同供應商同一個型號的差異, 由于前面說的添加配方與你的試驗條件配合的不同,這個差異可能大也可能小. 具體要根據試驗結果來確定最后的選擇.
